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1.
Braz. j. microbiol ; 46(4): 957-968, Oct.-Dec. 2015. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-769664

RESUMO

Abstract L-glutaminase was produced by Streptomyces canarius FR (KC460654) with an apparent molecular mass of 44 kDa. It has 17.9 purification fold with a final specific activity 132.2 U/mg proteins and 28% yield recovery. The purified L-glutaminase showed a maximal activity against L-glutamine when incubated at pH 8.0 at 40 °C for 30 min. It maintained its stability at wide range of pH from 5.0 11.0 and thermal stable up to 60 °C with Tm value 57.5 °C. It has high affinity and catalytic activity for L-glutamine (Km 0.129 mM, Vmax 2.02 U/mg/min), followed by L-asparagine and L-aspartic acid. In vivo, L-glutaminase showed no observed changes in liver; kidney functions; hematological parameters and slight effect on RBCs and level of platelets after 10 days of rabbit's injection. The anticancer activity of L-glutaminase was also tested against five types of human cancer cell lines using MTT assay in vitro. L-glutaminase has a significant efficiency against Hep-G2 cell (IC50, 6.8 μg/mL) and HeLa cells (IC50, 8.3 μg/mL), while the growth of MCF-7 cells was not affected. L-glutaminase has a moderate cytotoxic effect against HCT-116 cell (IC50, 64.7 μg/mL) and RAW 264.7 cell (IC50, 59.3 μg/mL).


Assuntos
Animais/química , Animais/efeitos dos fármacos , Animais/enzimologia , Animais/metabolismo , Animais/farmacologia , Antineoplásicos/química , Antineoplásicos/efeitos dos fármacos , Antineoplásicos/enzimologia , Antineoplásicos/metabolismo , Antineoplásicos/farmacologia , Biocatálise/química , Biocatálise/efeitos dos fármacos , Biocatálise/enzimologia , Biocatálise/metabolismo , Biocatálise/farmacologia , Proliferação de Células/química , Proliferação de Células/efeitos dos fármacos , Proliferação de Células/enzimologia , Proliferação de Células/metabolismo , Proliferação de Células/farmacologia , Estabilidade Enzimática/química , Estabilidade Enzimática/efeitos dos fármacos , Estabilidade Enzimática/enzimologia , Estabilidade Enzimática/metabolismo , Estabilidade Enzimática/farmacologia , Glutaminase/química , Glutaminase/efeitos dos fármacos , Glutaminase/enzimologia , Glutaminase/metabolismo , Glutaminase/farmacologia , Glutamina/química , Glutamina/efeitos dos fármacos , Glutamina/enzimologia , Glutamina/metabolismo , Glutamina/farmacologia , Células HeLa/química , Células HeLa/efeitos dos fármacos , Células HeLa/enzimologia , Células HeLa/metabolismo , Células HeLa/farmacologia , /química , /efeitos dos fármacos , /enzimologia , /metabolismo , /farmacologia , Humanos/química , Humanos/efeitos dos fármacos , Humanos/enzimologia , Humanos/metabolismo , Humanos/farmacologia , Cinética/química , Cinética/efeitos dos fármacos , Cinética/enzimologia , Cinética/metabolismo , Cinética/farmacologia , Streptomyces/química , Streptomyces/efeitos dos fármacos , Streptomyces/enzimologia , Streptomyces/metabolismo , Streptomyces/farmacologia , Especificidade por Substrato/química , Especificidade por Substrato/efeitos dos fármacos , Especificidade por Substrato/enzimologia , Especificidade por Substrato/metabolismo , Especificidade por Substrato/farmacologia
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